广东药科大学课堂教案
日期：2017.04.18 学时：2
授课内容（章/节）第六章 分子生物学研究法（下）-2
教学目的和要求
掌握：
1、酵母杂交的基础知识
2、酵母双杂交的原理与酵母双杂交的应用
3、酵母单杂交的原理与酵母单杂交的应用
4、Southern Blot的原理
5、Northern Blot的原理
6、RNA干扰的原理
熟悉：
1、Southern Blot的应用
2、Northern Blot的应用
3、基因芯片的应用
4、RNA干扰技术的应用
了解
1、酵母双杂交和酵母单杂交的操作步骤
2、Southern Blot的操作步骤
3、Northern Blot的操作步骤
4、斑点杂交的操作步骤
5、RNA干扰现象的发现
教学内容（★表示重点；▲表示难点）
1、酵母杂交的基础知识：反式作用因子由两个或两个以上结构上可以分开，功能上相互独立的结构域构成。这两个结合域将它们分开时仍分别具有功能，但不能激活转录，只有当被分开的两者通过适当的途径在空间上较为接近时，才能重新呈现完整的转录因子活性，并可激活上游激活序列的下游启动子，使启动子下游基因得到转录。（★▲）
2、酵母双杂交的基本原理（★▲）
3、酵母双杂交的应用：已知蛋白之间相互作用的检测、蛋白质的功能域研究以及克隆新基因和新蛋白（★）
4、酵母单杂交系统的基本原理
5、酵母单杂交的应用：确定某个DNA分子与某个蛋白质之间是否存在相互作用、分离编码结合于特定顺式调控元件或其他DNA位点的功能编码基因、验证反式作用因子的DNA结合结构域、准确定位参与特定蛋白质结合的核苷酸序列（★）
6、Southern Blot的原理、用途及操作步骤（▲）
7、Northern Blot的原理、用途及操作步骤（▲）
8、基因芯片的操作步骤与应用
9、RNA干扰技术：RNA干扰现象的发现；RNA干扰的基本原理；RNA干扰技术的
应用：功能基因组的研究、疾病治疗以及其在植物中的应用（★▲）
教学方法及教学手段
教学方法：讲授式＋启发式、课堂讨论与小结。
教学手段：flash、ppt、板书，图片。
以讲解和flash演示为主，重点在于对原理的讲解，由于许多内容涉及具体的实验操作，用视频进行介绍，使学生对实验过程有较为直观的印象。
作业：
复习本章节内容，重点把握分子克隆的流程及操作，以小组为单位设计一个基因的克隆操作。